OBSERVACIONES Y PAISAJES HEMATOLÓGICOS
Para observar el cómo es la sangre que nos da la vida existen con muy diversas categorías los siguientes aparatos :
1/ Microscopio de campo claro.
2/ Microscopio de campo oscuro.
3/ Microscopio de Contraste de Fase.
4/ Microscopio electrónico clásico. (M.E.T).
5/ Microscopio electrónico de barrido. (M.E.B).
Foto-Relieve de células sanguíneas obtenidas por microscopio electrónico de barrido y coloreadas gráficamente para su identificación : Rojo_ hematíes, Azul_ granulocito, Amarillo_ linfocito, Azul claro_ plaquetas, Morado intenso y pálido_ monocito.
Imagen: Steve Gschmeissner/science photo library.
TÉCNICAS DE OBSERVACIÓN___
La primera operación consiste en fijar el producto a estudiar sobre un portaobjetos transparente al cual deberá quedar adherido. Para conseguirlo con bacterias se usa el calor moderado, para hacerlo con células sanguíneas basta el secado al aire seguido de un baño de metanol, para anatomía patológica hay que fijar habitualmente con formol y después de congelados o incluídos en parafina y así poder cortar planos muy delgados y montarlos sobre dicho portaobjetos antes de teñirlo, y para microscopía electrónica se hace un fijado con impregnación de sales de plomo con el objeto de que se depositen en las estructuras orgánicas y así puedan apreciarse la más pequeñas partículas del especímen por la capacidad de este pesado metal para absorber los electrones emitidos, dejando impresas sus imágenes bien en un una pantalla sensible o en un cliché fotográfico.
En el primer instrumento : Microscopio de campo claro, el más antiguo se pueden observar todos aquellas partículas fijadas al portaobjetos que tengan un u opacidad propia, pero para ver aquellas que no lo tienen, gozando de total transparencia es necesaria una tinción posterior al proceso de fijación.
En el segundo instrumento : Microscopio de campo oscuro la incidencia de la luz es desde el plano lateral en toda su circunferencia alrededor de la muestra, por lo que donde no existe materia alguna se ve oscuro y las partículas brillan nítidamente ofreciendo un enorme poder resolutivo. También resultan muy positivas y bellas las imágenes en fondo oscuro de especímenes teñidos previamente con las mismas tinciones utilizadas en campo claro que ahora por incidencia del efecto Raman cambian sus colores y hacen sumamente más visible estructuras más finas y discretas como lo son los microtúbulos citoplásmicos.
El tercer instrumento : Microscopio de contraste de fase se basa en la genial idea de Zernike de transformar los cambios del índice de refracción de cada elemento celular en cambios de fase por lo que se producen interferencias luminosas con cambios en la absorción lumínica de los mismos. Con este instrumento se puede estudiar la vida celular si detenerla, pues no son necesarias ni fijación ni tinción. Es muy significativo el observar fenómenos como la fagocitosis, los movimientos de protozoos y los movimientos celulares espontáneos de los granulocitos de la sangre emigrados bien a la saliva humana o bien a la orina. Se observan nítidamente los movimientos intensos de los gránulos intraleucocitarios de tipo browniano acaecidos debidos a cambios de viscosidad en el medio y a variaciones de temperatura en las bases energéticas mitocondriales.
El cuarto instrumento: Microscopio electrónico de Transmisión (M.E.T) , como ya se ha enunciado, funciona utilizando un chorro de electrones para chocar en átomos de plomo adheridos por fijación a las más finas estructuras celulares. Posee esta proyección un límite de ampliación de imagen muy superior a los instrumentos ópticos. Cada partícula celular por pequeña que sea se ve ampliada miles de veces descubriéndose infinidad de subpartículas a investigar.
El quinto instrumento: Microscopio Electrónico de Barrido (M.E.B) también utiliza corrientes electrónicas que se reflejan a lo largo de las superficies de la muestra, previamente metalizadas, donde sin penetración alguna se reflejan los electrones dando por proyección sobre una pantalla sensible la imagen fidedigna y en relieve del especímen, por lo que se denomina microscopio de barrido electrónico. Tiene mucho menor poder de ampliación que el ya citado cuarto instrumento (M.E.T.), de travesía electrónica a través de la estructura estudiar, pero da una idea muy exacta de sus dimensiones y de su relieve más fino..
Es de tener en cuenta que el primer, segundo, cuarto y quinto instrumento necesitan de una fijación en la muestra, sea de colorante o sea de un metal para poder ser apreciada dada la transparencia de las materias a estudiar,sea con electrones o sea con fotones luminosos. Sin embargo el Microscopio de Contraste de Fase (Zernike) no requiere tinción previa, ya que se basa en hacer apreciables las diferencias de fase entre los fotones que atraviesan la muestra, lo que da una imagen visual y real en ella de sus diferentes índices de refracción de cada parte celular, y todo ello incluso en vivo.
Exhibiremos algunas imágenes y filmaciones de todos estos instrumentos.
PAISAJES HEMATOLÓGICOS.-
La sangre, nuestro medio de nutrición e hidratación y sistema de defensa ante las agresiones bacterianas y víricas, está compuesta por una gran mayoría de glóbulos rojos, células desprovistas de núcleo reproductor y una minoría de glóbulos blancos o leucocitos , mezcla de granulocitos y linfocitos ,junto con pequeños corpúsculos llamados "plaquetas", provenientes de otras células medulares ( o megacariocitos), que circulan junto a todos ellos para prevenir, por coagulación, la pérdida de sangre en posibles hemorragias traumáticas.
Los llamados granulocitos poseen una importancia máxima frente a toda clase de infecciones externas, bien sean bacterias a las que destruyen por la agresión química de sus gránulos emitidos afuera o por fagocitosis, o sea por ingestión y posterior digestión con sus gránulos internos formando lagunas o lisosomas.
Veremos que dichos granulocitos, al pasar a medios externos de mayor presión osmótica, veremos , como dije, que comienzan a agitar sus partículas de forma intensa por fuerzas de movimiento browniano incrementadas por variaciones metabólicas de temperatura de mitocondrias que las mueven entre los elásticos microtúbulos del casis o armazón plasmática, después de lo cual, rompiéndose la membrana celular, son liberados al medio externo. En el torrente sanguíneo acaban fijándose en cualquier cuerpo extraño al que digieren o a cualquier bacteria o virus al que marcado o no marcado por anticuerpos linfocitarios intoxican y matan o, en caso de resistencia, reducen sus movimientos mediante la aparición de redes de fibrina procedentes del fibrinógeno del medio plasmático sensibilizado por la agresión de dichos gránulos. Igual hacen en la orina, en la saliva o en los esputos siendo agentes de asepsia muy notable.
Es de señalar que en la sangre circulan granulocitos nacidos en la médula ósea y linfocitos nacidos en los ganglio linfáticos del cuerpo. Éstos últimos son los encargados de reconocer antígenos externos y capaces de crear anticuerpos proteínicos (Globulinas) que se fijarán en las bacterias o virus impidiendo su respiración o su nutrición y con ello la muerte. Todas las células sanguíneas tienen su tiempo de existencia y acaban muriendo, de modo que el bazo y los ganglio linfáticos terminan eliminando los restos de estas células muertas , no obstante también se pueden observar alunas veces mientras van circulando por el torrente sanguíneo hacia las depuradoras fisiológicas citadas.
Los granulocitos más voluminosos, dotados de un gran núcleo no alargado, sino frecuentemente lobulado se denominan en la sangre monocitos y cuando emigran a cualquier tejido inflamado se llaman macrófagos. Se encargan de la fagocitosis de partículas extrañas grandes que digieren y eliminan. Con los leucocitos forman la primera barrera defensiva y de limpieza contra cualquier clase de proteína desconocida, sea vírica o bacteriana.
Los linfocitos , más pequeños, dotados de mayor volumen nuclear, respecto del citoplásmico, nacidos en los ganglios linfáticos, se dividen en tres grupos T, B y NK. Los linfocitos T y B forman la unidad adaptativa. Los linfocitos T suelen sensibilizar, en momentos determinados, la actividad de los linfocitos B . Ambos, T y B, son agentes que descubren y sintetizan anticuerpos efectivos contra virus o bacterias , pudiendo regular la inflamación manteniendo la memoria de otras infecciones antiguas. Los linfocitos NK son llamados células asesinas porque neutralizan a cualquier elemento dotado de proteínas no idénticas al propio genoma, incluidas las células cancerígenas que sufren atipias del mismo, así que representan la verdadera defensa natural frente al cáncer.
Microscopio de Campo Claro.-
Microscopio de Campo Oscuro + Coloración de Wright
| Segmentado |
| Segmentado y monocito compartiendo datos. Microtúbulos en segmentado Dos eosinófilos lisados + un linfocito de reconocimiento |
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Túbulos a través de la membrana para captar oxígeno
Microscopio de Contraste de Fase.-
Microscopio Electrónico de Transmisión (M.E.T)
Microscopio Electrónico de Barrido (M.E.B)
